第五章　分枝杆菌菌种鉴定

根据《伯杰细菌鉴定手册》将分枝杆菌分为两类，即缓慢生长和快速生长。Runyon在1959年又将排除了结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌后的其他分枝杆菌依据生长速度、菌落色素和致病性分为4群，即光产色Ⅰ群、暗产色Ⅱ群、不产色Ⅲ群和快速生长的Ⅳ群。由于分枝杆菌种类繁多，各菌种生物学特性、致病性、药物敏感性等不尽相同，在分枝杆菌及其所致疾病的基础研究、预防和治疗中，菌种鉴定具有十分重要的意义。菌种鉴定是在培养的基础上，进一步对获得的纯菌进行鉴定，以确认该菌的细菌学分类（参加附件10）。

分枝杆菌菌种鉴定的一般实验流程为:①先经抗酸染色镜检确定是抗酸菌，然后增菌传代；②进行分枝杆菌菌种鉴定:首先经对硝基苯甲酸（PNB）生长试验、28℃生长试验、耐热触酶试验、观察记录细菌的生长速度、菌落形态和菌落颜色确定该菌株属于结核分枝杆菌复合群还是非结核分枝杆菌（NTM）；③经菌群鉴定试验确定属于结核分枝杆菌复合群的菌株，需进行噻吩-2-羧酸肼（TCH）生长试验、硝酸还原试验和烟酸试验进行菌种鉴定；④属于NTM的菌株，首先根据生长速度的快慢确定属于快速生长还是缓慢生长的分枝杆菌。快速生长的分枝杆菌可通过生长特征和生化实验进行菌种鉴定；缓慢生长的分枝杆菌经色素产生试验确定菌株的产色特征后，再通过生长特征和生化试验确定菌株的种类。但因分枝杆菌种类繁多，菌株变异广泛，基于生物特性的生化鉴定区分较困难，随着分子生物学研究和基因测序技术的发展，基于分枝杆菌基因序列的检测能快速准确地鉴别分枝杆菌。